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細胞計數的方法和原理主要是哪些呢•│₪◕?

  • 釋出日期☁☁:2022-01-11      瀏覽次數☁☁:309
    •   細胞計數是細胞實驗中非常重要的一個環節₪▩╃,科研工作者需要從多方面對培養的細胞進行分析₪▩╃,比如活細胞數☁✘╃☁、死細胞數☁✘╃☁、細胞存活率等↟••。經典的透過臺盼藍染色方法對細胞進行人工計數₪▩╃,是我們研究細胞常備技能之一↟••。隨著科技發展₪▩╃,自動化的細胞計數儀應運而生₪▩╃,它以便捷☁✘╃☁、快速等優勢被廣泛應用到細胞實驗中↟••。
        細胞計數的方法和原理主要是哪些呢•│₪◕?
        1.手工顯微鏡法
        又稱血球計數板法₪▩╃,是原始的細胞計數方法₪▩╃,顯微鏡下調整不同放大倍數的物鏡₪▩╃,透過染色的方法人工觀察細胞狀態判斷細胞死活₪▩╃,進行計數↟••。透過檢測出一定體積的均勻細胞懸液中的細胞個數(對一定數量的小格或中格計數₪▩╃,根據相應的小/中格所佔的體積₪▩╃,可以推算出單位體積的溶液中微生物細胞的密度或總數)₪▩╃,換算出每毫升的細胞個數₪▩╃,從而得到細胞懸液的細胞濃度↟••。實驗過程中採用五點取樣法₪▩╃,即一般隨計數室四角上的四個中方格以及正中間的一箇中方格進行統計(對於壓線的₪▩╃,採取數上不數下₪▩╃,數左不數右的原則)↟••。這種方法數細胞的原則是隻數完整的細胞₪▩╃,若細胞聚整合團時₪▩╃,按照1個細胞計算↟••。
        2.庫爾特原理又稱電阻抗檢測原理↟••。細胞是相對不良導體₪▩╃,當細胞懸浮電解質中₪▩╃,將小孔管插入細胞懸液₪▩╃,使其管內充滿稀釋液₪▩╃,位於小孔管兩側電極產生穩定電流↟••。當一個細胞透過小孔時₪▩╃,瞬間引起電壓變化出現一個脈衝訊號₪▩╃,細胞體積越大₪▩╃,引起脈衝越大₪▩╃,產生脈衝振幅越高₪▩╃,脈衝訊號由下列步驟完成☁☁:①放大;②閾值調節;③甄別;④計數↟••。採用這種計數原理的儀器具代表性的是CASY細胞計數儀₪▩╃,這種原理的儀器內建液路系統₪▩╃,需要定期清洗管路防止堵塞↟••。
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